血清中可能出現(xiàn)的沉淀物是什么?
用于細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清以及其他血清中可能會(huì)存在以下種類的沉淀物:
1、纖維蛋白,它是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物,可以達(dá)到1-2mm,可以用肉眼觀察到。因?yàn)檠宥际窃诘蜏叵逻M(jìn)行收集和快速處理的,一些纖維蛋白原(可溶性的形成絮狀纖維蛋白的前體)在處理過(guò)程中仍然處于溶解狀態(tài),當(dāng)經(jīng)過(guò)最后的過(guò)濾分裝后,就會(huì)在瓶中凝結(jié)出現(xiàn)纖維蛋白沉淀。
2、磷酸鈣,它也是常見(jiàn)的一種沉淀物,通常會(huì)使血清出現(xiàn)渾濁,并且在37℃培養(yǎng)的時(shí)候會(huì)增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點(diǎn),這些小黑點(diǎn)由于布朗運(yùn)動(dòng)看上去可以活動(dòng),因此經(jīng)常被誤認(rèn)為是微生物污染。
3、膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì)。他們也是血清中出現(xiàn)沉淀物的常見(jiàn)原因。
最常見(jiàn)的沉淀物,就是我們?cè)谘迦诨^(guò)程中有時(shí)候會(huì)出現(xiàn)的沉淀,今天給大家科普下這些沉淀都是什么,我們?nèi)绾味沤^這種情況。
血清中包含絮狀沉淀是什么呢?沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里(一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以,使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃,沉淀會(huì)自然消失。
按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
(1)解凍血清/分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
(2)勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
(3)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無(wú)須做此步驟。
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